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Issue
Microsc. Microanal. Microstruct.
Volume 3, Number 2-3, April / June 1992
Page(s) 175 - 186
DOI https://doi.org/10.1051/mmm:0199200302-3017500
Microsc. Microanal. Microstruct. 3, 175-186 (1992)
DOI: 10.1051/mmm:0199200302-3017500

New possibilities in the observation of nucleic acids by electron spectroscopic imaging

Etienne Delain1, Alain Fourcade1, Bernard Révet1 et Claudie Mory2

1  Laboratoire de Microscopie Cellulaire et Moléculaire, URA 147 du Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Institut Gustave Roussy, rue Camille Desmoulins, F-94805 Villejuif Cedex, France
2  Laboratoire de Physique des Solides associé au CNRS, Bâtiment 510, Université Paris Sud, F-91405 Orsay Cedex, France


Abstract
The conditions for the use of Electron Spectroscopic Imaging (ESI) in the observation of DNA molecules adsorbed on carbon film are described. The Zeiss 902 electron microscope with its built-in spectrometer allows original modes of imaging, such as energy-filtered annular dark-field. The six different modes of imaging are illustrated with either positively stained or metallized DNA preparations to show the resulting important differences in contrast. The very strong contrasts obtained in annular or spectroscopic dark-field modes on specimens presenting a very low contrast in traditional bright-field are very useful for the observation of biological macromolecules. The advantages of some observation modes for imaging different types of preparations are discussed.


Résumé
Les conditions d'utilisation de l'imagerie par spectroscopie de pertes d'énergies des électrons pour l'observation de molécules d'ADN adsorbées sur film de carbone sont décrites. Le microscope électronique Zeiss 902 avec spectromètre incorporé à la colonne permet de former des images selon des modes originaux, tel que le fond noir annulaire filtré en énergie. Les six différents modes de formation des images sont illustrés sur des préparations d'ADN coloré positivement ou métallisé, pour montrer les importantes différences de contrastes. Les très forts contrastes obtenus en fond noir annulaire ou spectroscopique à partir de préparations ne présentant que très peu de contraste en fond clair traditionnel sont très utiles pour l'observation de macromolécules biologiques. Les avantages de certains modes d'observation pour l'étude de différents types de préparations sont discutés.

PACS
0781 - Electron and ion spectrometers.
8764E - Electron microscopy.
8715 - Biomolecules: structure and physical properties.

Key words
EEL spectroscopy -- Adsorbed state -- DNA -- Electron microscopy -- Dark field microscopy -- Bright field microscopy -- Molecular interaction -- Conformation -- Specimen preparation


© EDP Sciences 1992